2 結(jié) 果
2.1 各組心肌組織HE 染色病理形態(tài)比較 假手術(shù)組心肌細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)完整，細胞排列整齊，無明顯病理損傷。MIＲI 模型組心肌細胞質(zhì)增多，細胞腫脹明顯，細胞排列紊亂、橫紋不清，并呈現(xiàn)點片狀壞死灶，提示細胞壞死程度嚴重。冠通方小劑量組可見心肌細胞水腫，排列紊亂，細胞漿增多，有明顯的病理損傷。對照組和冠通方大、中劑量組心肌細胞腫脹較輕，心肌細胞偶有壞死，細胞排列有序。詳見圖 1。
各組心肌細胞凋亡情況比較 光鏡下呈棕色的心肌細胞核為凋亡的陽性細胞，呈藍色則為非凋亡的陰性細胞。本研究結(jié)果表明: 冠通方大、中劑量組凋亡細胞數(shù)較模型組顯著減少。詳見圖 2。各組心肌細胞凋亡指數(shù)比較見表 1。
3 討 論
細胞凋亡是細胞死亡的一種形式，其參與缺血再 灌注損傷的病理過程，是缺血再灌注損傷引起心肌細 胞死亡的主要原因，成為缺血再灌注損傷影響組織心 臟功能的重要途徑和表現(xiàn)形式。已有許多研究表明， MIＲI 與細胞凋亡密切相關(guān)［3-5］。因此，減少心肌細胞凋亡是減少缺血再灌注心肌損傷的有效途徑。
MIＲI 中醫(yī)病機包括氣虛、血瘀、痰飲不同的病理過程。謝連娣等［6］指出，氣虛導(dǎo)致血瘀和痰飲的形成， 血瘀和痰飲導(dǎo)致氣虛程度進一步加重。急性心肌梗死 時血液供應(yīng)驟然停止，失去了血液的濡養(yǎng)和運載; 急性心肌梗死時，血栓堵塞血液的正常運行，邪正交爭，正 氣損傷; 再灌注時突然過多的血液等待運送到組織遠端，增加心臟的負擔(dān)，均導(dǎo)致氣虛的形成。心氣虛無力 推動血液運行，造成微血管栓塞，形成“血瘀”。氣虛血瘀可以導(dǎo)致水液代謝受到影響，水液留聚，形成“痰 飲”。多數(shù)學(xué)者亦認為缺血再灌注損傷的過程涉及氣虛、血瘀、痰飲、痰瘀化熱化毒; 以氣虛為本，血瘀痰飲為標。
冠通方方中田七善于活xue化瘀，消腫止痛，其化瘀 血而不傷新血; 丹參性寒涼血，又善活xue化瘀，清瘀熱， 消癰腫，除煩**; 地龍咸寒，善于活xue血祛瘀通絡(luò)，同時又能清熱化痰; 瓜蔞甘寒微苦，善于清熱化痰，**寬胸，消腫散結(jié)，同時又具有潤腸通便，瀉腑安臟之功; 生 曬參善于大補元氣，同時又有生津之功; 絞股藍甘苦性寒具有**養(yǎng)陰，消熱**，清熱祛痰之功; 麥冬甘苦微寒，清熱養(yǎng)陰生津; 陳皮辛散溫通，善于**燥濕化 痰。諸藥合用則具有**養(yǎng)陰，清熱**化痰，**活 血化瘀通絡(luò)之功［7］。田七又名三七，主產(chǎn)于云南、廣西 等地。現(xiàn)代基礎(chǔ)研究表明: 三七中含有三七總皂苷( PNS) ，三七的主要成分是三七總皂苷，已經(jīng)有報道關(guān)于 PNS 有良好的抗氧化作用［8］，并能抵抗自由基對心肌缺血再灌注后導(dǎo)致的心肌細胞損傷。此外，三七皂 苷可抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，減輕心肌細胞的受損情況， 增強抗氧化效果，并具有抑制血小板聚集，促進纖維蛋 白溶酶的活性，降低血液黏度，促進血栓溶解，改善血 液流動的作用。顧國嶸等［9］通過酶學(xué)、形態(tài)學(xué)、**組織化學(xué)等研究表明，PNS 缺血預(yù)處理 24 h 后能明顯減少缺血-再灌注導(dǎo)致的心肌細胞壞死和凋亡，對缺血- 再灌注心肌起到延遲保護作用，證明三七**缺血性 心臟病的基礎(chǔ)。PNS 能擴張冠脈，增加心肌營養(yǎng)血流量，改善心肌微循環(huán)，明顯降低心肌耗氧量。同時 PNS 的抗脂質(zhì)過氧化作用也是其保護缺血-再灌注心肌的 重要方面。丹參的抗氧化成分有丹參酮類、丹參素、丹 酚酸類化合物、原兒茶醛、咖啡酸及迷迭香酸，有研究指出［10-11］，丹參酮 Ⅱ A 可抑制細胞膜上的 NADH /NADPH 氧化酶的激活，提高超氧化物歧化酶( SOD) 的活性，**氧自由基并抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，發(fā)揮保護血管內(nèi)皮細胞的作用。研究表明［12］ 丹參凍干粉對經(jīng)皮冠狀動脈介入**( PCI) 后 MIＲI 有保護作用，其可能的機制是抑制炎癥反應(yīng)，改善內(nèi)皮功能。
本研究通過冠通方對兔 MIＲI 心肌細胞凋亡研究
時發(fā)現(xiàn)，冠通方可有效發(fā)揮心肌細胞保護作用，使 MI- ＲI 細胞凋亡趨勢下降、減少心肌病理損傷，為心肌細胞后期修復(fù)打好了堅實的基礎(chǔ)。冠通方對 MIＲI 損傷心肌的保護作用是多機制、多靶點、綜合作用，因此冠通方對心肌細胞的保護機制依然需要后續(xù)探索研究。
參考文獻:
［1］ 王強，韋斌，姜浩，等． 冠通方對大鼠心肌缺血/ 再灌注損傷心肌組織 IL-8 和 IL-10 蛋白表達的影響［J］． 廣西中醫(yī)藥，2015，38 ( 5) : 57-60．
［2］ 陳奇．中藥藥理研究方法學(xué)［M］． 第 2 版．北京: 人民衛(wèi)生出版社，2006: 1167-1170．
［3］ 韓平，馮俊，陳華文．丹參酮ⅡA 對大鼠心肌缺血再灌注后細胞凋亡的機制研究［J］． 中國中醫(yī)急癥，2016，25 ( 10 ) : 1844-1846; 1873．
［4］ 田岳鳳，zhang斌仁，高海寧，等．針刺對心肌缺血再灌注損傷大鼠心肌組織 CaMKⅡ表達及細胞凋亡的影響［J］． 中華中醫(yī)藥雜志，
2015，30( 8) : 2983-2986．
［5］ 張翠香，劉建勛，李丹，等．冠脈通片對心肌缺血再灌注損傷大鼠心肌酶及心肌細胞凋亡的影響［J］． 中醫(yī)雜志，2014，55( 20) : 1760- 1763．
［6］ 謝連娣，劉洋，周琨，等． 心肌缺血再灌注損傷的中醫(yī)病機淺識［J］． 中華中醫(yī)藥雜志，2015，30( 9) : 3139-3141．
［7］ 何勁松，王強，易自剛，等． 冠通方對冠狀動脈裸金屬支架植入術(shù)后再狹窄的影響［J］． 中醫(yī)雜志，2010，51( 5) : 423-425．
［8］ 殷昌青，鄧海山，程健． 三七對血液、心腦血管和**神經(jīng)系統(tǒng)的藥理作用研究概述［J］． 科技信息，2010( 29) : 56-57．
［9］ 顧國嶸，黃培志，葛均波，等．缺血及三七總皂苷預(yù)處理對心肌缺血-再灌流損傷的保護作用［J］． 中華急診醫(yī)學(xué)雜志，2005，14 ( 4) : 307-309．
［10］ 韓暢，王孝銘，張國義． 丹參對心肌缺血和再灌注損傷的保護作用［J］．中國病理生理雜志，1991，7( 4) : 337-341．
［11］ 楊志霞，林謙，馬利． 丹參對心血管**藥理作用的文獻研究［J］．世界中西醫(yī)結(jié)合雜志，2012，7( 2) : 93-96．
［12］ 林欣．丹參凍干粉**心肌缺血再灌注損傷的臨床觀察［J］． 中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2013，11( 2) : 164-165．
( 收稿日期: 2017-02-16)
( 本文編輯 郭懷印)