一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
1、學(xué)習(xí)小白鼠學(xué)習(xí)記憶行為檢測(cè)方法
2、學(xué)習(xí)小鼠避暗自動(dòng)測(cè)試儀的使用方法。
3. 了解影響學(xué)習(xí)記憶功能的一些因素。
二、實(shí)驗(yàn)原理
嚙齒類動(dòng)物系夜行性動(dòng)物,喜歡黑暗的地方,而回避光亮之地。它將設(shè)法逃向暗處,此時(shí)在暗處給予其電刺激,小鼠會(huì)被迫逃回明亮處,并獲得記憶。根據(jù)此原理設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)為一次性被動(dòng)回避反應(yīng)實(shí)驗(yàn)。
被動(dòng)回避反應(yīng)(Passive Avoidance Response)為二十世紀(jì)60年代后期發(fā)展起來(lái)的、普遍用于檢測(cè)小動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶能力的一種動(dòng)物模型。反應(yīng)特征:動(dòng)物必須學(xué)會(huì)躲避可怕的事件,而抑制其天然本性。被動(dòng)回避反應(yīng)有:避暗法(又稱步入法step-through test)、跳臺(tái)法(又稱步下法step-down test)等。
三、實(shí)驗(yàn)器材
小白鼠常用手術(shù)器械、亞**鈉、東莨菪堿(scopolamine,Scop.)、生理鹽水、35 %酒精。(廠家:北京智鼠多寶生物公司))
四、實(shí)驗(yàn)步驟
1. 實(shí)驗(yàn) 儀器
北京智鼠多寶生物科技發(fā)展有限責(zé)任公司小鼠避暗自動(dòng)測(cè)試儀由控制器和活動(dòng)箱兩部分組成,可同時(shí)對(duì)6只小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。明暗實(shí)驗(yàn)箱之間有一小門供動(dòng)物進(jìn)出,當(dāng)動(dòng)物進(jìn)入暗室被電擊時(shí),它可自動(dòng)記錄小鼠**次從明室進(jìn)入暗室的潛伏期和受到電擊的次數(shù),還可通過(guò)按鍵靈活地選擇刺激電壓和設(shè)置實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
2. 實(shí)驗(yàn)程序:
2.1適應(yīng):將動(dòng)物頭朝室壁放入明室,兩室之間的門洞敞開,讓動(dòng)物在兩室內(nèi)自由活動(dòng)2-3分鐘,取出后放回飼養(yǎng)籠。
2.2訓(xùn)練:**天, 將動(dòng)物放入明室, 它很快鉆入暗室, 連接兩室的門洞關(guān)閉,同時(shí)啟動(dòng)電刺激器, 動(dòng)物足部受電擊。如果動(dòng)物在**次訓(xùn)練時(shí)超過(guò)100秒不進(jìn)暗室, 淘汰之或用手把它輕輕趕進(jìn)暗室。
記錄指標(biāo):
(1)記錄動(dòng)物自明室進(jìn)入暗室的潛伏期,可作為判斷給藥后動(dòng)物行為是否有變的一個(gè)指標(biāo)。若**致使動(dòng)物**,則潛伏期顯著長(zhǎng)于對(duì)照組。
(2)記錄動(dòng)物受到電擊后的反應(yīng),如劇烈嘶叫并跳躍,評(píng)為A級(jí)反應(yīng);微弱尖叫,評(píng)為B級(jí)反應(yīng);不叫,評(píng)為C級(jí)反應(yīng)。受到電擊后動(dòng)物一般均跳躍。C級(jí)反應(yīng)常伴動(dòng)物跳躍,動(dòng)物雖不尖叫,但正常動(dòng)物均能感受電擊疼痛,顯示好的記憶成績(jī)。C級(jí)反應(yīng)多見(jiàn)于雄性動(dòng)物。A級(jí)反應(yīng)多見(jiàn)于雌性動(dòng)物。該記錄可作為動(dòng)物痛域是否變化的一個(gè)輔助觀察指標(biāo)。
2.3重測(cè)試:訓(xùn)練后24小時(shí)(第三天),再次將動(dòng)物放入明室,進(jìn)行重測(cè)試。
記錄指標(biāo):
(1)記錄動(dòng)物進(jìn)入暗室的潛伏期,為步入潛伏期(step through latency, STL)。*大潛伏期設(shè)為300秒。
(2)記錄動(dòng)物300秒內(nèi)進(jìn)入暗室的錯(cuò)誤次數(shù),包括**次錯(cuò)誤進(jìn)入暗室的次數(shù)。
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)舉例
按照信息論將記憶簡(jiǎn)單劃分為:記憶的獲得(也即學(xué)習(xí)過(guò)程、信息的獲得過(guò)程)、記憶的鞏固(信息的保持過(guò)程)、記憶的再現(xiàn)(信息的提取過(guò)程)時(shí),我們可依此來(lái)篩選作用于記憶不同階段的認(rèn)知**。
在訓(xùn)練前、后或重測(cè)前給損傷動(dòng)物記憶的**,可分別觀察該**對(duì)記憶不同階段的影響,在此之前給動(dòng)物待檢測(cè)認(rèn)知**,即可依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷該認(rèn)知**對(duì)抗損傷**的效果。為簡(jiǎn)化篩選工作,常選用實(shí)驗(yàn)步驟較少的小動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶測(cè)試方法,現(xiàn)以步入法為例說(shuō)明如下。